《超級瑪利歐銀河電影版》故事敘述當他們適應了在蘑菇王國的全新生活之後，瑪利歐（克里斯普瑞特 配音）與路易吉（查理戴 配音）因為收到一個神秘的求救訊號再度展開一場驚險刺激的救援行動，這個訊號則指向碧姬公主（金球獎得主安雅泰勒喬伊 配音）從未被探索的過去。這項任務將把瑪利歐與路易吉以及他們建立的全新家人和朋友帶離熟悉的地方，展開一場橫跨全新世界的浩瀚星際冒險旅程，並且在途中遇見意想不到的盟友。
這部電影的配音演員陣容包括再度回歸，為大魔王庫巴配音的金球獎入圍者傑克布萊克、為奇諾比奧配音的艾美獎得主基根麥可奇以及為卡美克配音的艾美獎入圍者凱文麥可理查森。全新的配音演員陣容則包括為庫巴Jr.配音的艾美獎得主班尼沙夫戴、為耀西配音的艾美獎及葛萊美獎得主唐納葛洛佛、為蜜蜂女王配音的艾美獎及金球獎入圍者伊薩蕾、為瑪穆配音的路易古茲曼，以及為羅潔塔配音的奧斯卡金像獎得主布麗拉森，還有為星際火狐配音的葛倫鮑威爾。
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